Raclage

Cet examen est particulièrement facile à réaliser en pratique courante : il nécessite un minimum de matériel, et s´avère peu onéreux, ce qui permet son renouvellement en cas de résultat négatif ou douteux.

Cependant il est souvent moins utilisé chez les NAC que chez les carnivores domestiques du fait de son côté traumatisant. On peut avoir recours à une sédation ou une anesthésie.

METHODE ET REALISATION
Préparation
Il est nécessaire, pour optimiser les chances de récolter des parasites, de choisir une lésion récente, non lichénifiée ou érodée, peu remaniée et n'ayant subi aucun traitement topique préalable. Le choix des zones cutanées à prélever est établi en fonction de l’agent parasitaire recherché, de la topographie et de l’aspect des lésions: dans le cadre d'une suspicion de teigne, il est préférable de racler le centre de la lésion. Dans la cadre d'une suspicion de gale par contre, il faut choisir une zone apparemment saine, ou un bouton de gale. Une tonte rapide est réalisée en périphérie en coupant les poils aux ciseaux, une désinfection légère est également possible, et permet, en cas de suspicion de teigne, d'éviter le développement de champignons saprophytes tout en permettant celui des Dermatophytes.
Technique
Le prélèvement s’effectue avec une lame de bistouri émoussée préalablement enduite de lactophénol ou d’huile minérale. Le raclage consiste à prélever l´épiderme et les parasites présents à sa surface ou dans son épaisseur, en raclant un pli de peau pressé entre le pouce et l´index, à l´aide de la lame de bistouri maintenue perpendiculairement. La peau doit être raclée toujours dans le même sens. La profondeur du raclage cutané dépend en théorie de la localisation du parasite recherché. Il est préférable de renouveler les raclages sur deux ou trois lésions d´âges différents.
Traitement et observation du prélèvement
Le matériel récolté est ensuite déposé sur une lame avec une goutte de liquide d'éclaircissement ( lactophénol , KOH, huile de paraffine), étalé et écrasé avec la lame de bistouri et recouvert d´une lamelle. Pour faciliter l´examen, il convient de bien délayer le produit de raclage afin de pouvoir l´étaler en une couche aussi fine que possible. En cas de prélèvement trop compact, il est également possible d'additionner une goutte de potasse à 10% et de chauffer légèrement la lame. Dans le cadre d'une recherche d'acariens, il est également possible de laisser tremper le prélèvement pendant 20 minutes dans de la potasse à 10% afin de digérer les débris, puis de centrifuger l'ensemble afin de concentrer les parasites, qui seront récupérés à la surface du liquide et observés au microscope. La lame est ensuite observée au microscope, au faible puis au fort grossissement (x10 et x40), le diaphragme étant réglé au minimum et la puissance de la lumière maximale. Pour une bonne fiabilité de l´observation, il convient de couvrir toute la surface de la préparation de façon méthodique.
Conservation
Les Demodex étant très fragiles et lysés rapidement, leur observation doit être immédiate. Les autres acariens résistent bien au lactophénol, ce qui permet une observation différée de la lame. La lame peut également être préparée de façon différée : Dans le cadre d'une recherche de teigne et en cas d'observation différée, le prélèvement peut être conservé dans un récipient sec, sans précaution particulière. Dans le cadre d'une recherche d'acariens ou de filaires, le prélèvement doit être conservé dans de l'alcool à 70° ou dans une boite accompagnée d'ouate humide afin d'éviter le dessèchement des parasites.
INTERPRETATION
La mise en évidence d'un parasite ou de ses oeufs par cette méthode conduit à un diagnostic de certitude le plus souvent. La présence de Myocoptes musculinus, de Myobia musculi, de Chirodiscoides caviae ou de Radfordia sp. n’explique pas la présence de troubles cutanés étant donné l’existence de nombreux porteurs asymptomatiques. On ignore si Listrophorus gibbus est commensale ou pathogène. Son observation ne permet pas un diagnostic de certitude de l’ectoparasitose en question. Toutefois, l’absence d’observation du parasite recherché ne permet pas d’exclure une hypothèse de dermatose parasitaire si le contexte épidémio clinique en est évocateur. Les faux négatifs peuvent être fréquents et dus : -à un mauvais choix des lésions (lésions trop anciennes et remaniées, difficulté d’accès, région du corps peu infectée) -à des difficultés techniques (parasite trop profond et/ou très disséminé, peau très épaisse) Le renouvellement des raclages ou la réalisation d’autres examens (traitement d’épreuve, mise en culture) permet dans cette situation de confirmer ou d´infirmer cette hypothèse.

LE MATERIEL NECESSAIRE
Ciseaux Lame de bistouri émoussée Lames de microscope dégraissées Lamelles Huile minérale : lactophénol ou hydroxyde de potassium (KOH) à 10 % pour une observation immédiate, ou huile de paraffine pour une conservation des parasites quelques heures Kit de coloration rapide (Diff Quick®, RAL 555®) Microscope optique Huile à immersion